随着钻研人员追求更拥有时效性、成本效益和伦理性的动物试验代替品，基于细胞的模型越来越遍及

。并且，造药公司之间寻找强有力的医治候选药物的强烈竞争必要适合大量分子评估的步骤

。

在基于细胞的高通量筛

。℉TS）试验中，在造就细胞中同时评估成百上千种化合物/前提

。这些试验的效能和尺度化是通过自动化实现的，出格是通过使用多通路移液头（MPH）、384/1536孔板和急剧分析系统

。

基于细胞的HTS工作流程的重要步骤可分为：（1）细胞维持造就和扩增，（2）细胞分化/3D形成，（3）化合物处置，（4）样品造备/活细胞成像和（5）分析

。细胞的维持造就通常必要每24-72幼时过问一次，以进行造就基更换和传代

。必须定期评估细胞活力和浓度/融合度，以确保造就物的健康，并满足在分歧规格的造就板中以适当浓度接种细胞的要求

。细胞分化和3D结构的形成必要精的确时地增长专门的试剂和使用专门的尝试室器皿


；衔锎χ猛ǔＴ诔⑹允移髅笾幸猿叨萐BS体式进行，通常为6-1536孔板

。为此，向细胞中参与分歧浓度的生物活性化合物（通常使用纳升领域内的体积），孵育，而后进行qPCR蛋白质分析或成像

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只管基于细胞的HTS有益处，但守护和处置细胞造就物必要专业知识和功夫

。多种参数能够影响细胞浓度、附着和存活率

。此表，基于细胞的试验通常涉及沉复性操作，且孵育/期待功夫较长，因而容易犯错

。自动化液体处置设备在处置细胞造就物方面拥有显著优势，这得益于工作站中的先进技术和专用软件

。这些自动化系统能够确保精确和善的吸液和分液、受控的温度和振荡，无菌性，以及与第三方设备整合进行自动化分析

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吸液和放液

液体处置必要两个步骤：吸液和放液


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。自动化系统能够节造各类移液参数，蕴含：（1）吸液和放液的速度（流速），（2）吸液起头或实现时吸入的空气量（吹出量和空气输送量），（3）吸液后移液头在液体中停顿的功夫（沉降功夫），（4）吸液和放液后移液头移出液体的速度（互换速度），以及（5）吸头相当于孔的地位等

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细胞造就过程中的一些常见挑战是对细胞的滋扰（蕴含在造就基更换过程中的吸液）、接种不均匀和涂层不均匀

。吸液和放液可产生应激诱导的自觉分化和细胞殒命

。通过调整移液参数，如流速和吸头定位，能够显著降低造就基更换期间产生这些事务或吸入细胞的可能性

。贴壁细胞的造就基更换必要以预防吸头与细胞接触的方式进行

。此表，通常手动倾斜造就板以预防在造就基吸入过程中滋扰细胞

。在自动化系统中，专门的倾斜
？榭扇繁Ｇ阈苯嵌纫恢，从而提高整个过程中的总体精度

。

细胞的接种不均匀通常是由造就基中产生的泡沫引起的，这是由于参与的血清蛋白含量较高

。事实上，在细胞接种过程中，气泡能够故障细胞附着，导致细胞计数的孔间差距-出格是当思考96孔和384孔板上每孔成长表表削减时

。此表，在造就基分配过程中产生的气泡会分裂、粉碎并可能杀死细胞，可通过调整流速、吹出量和空气输送量（放液额表吹出空气量和吸液后额表空气吸入量）等参数、使用表表分液和大口径吸头以及预防过度移液来预防气泡形成

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图层不均匀是粘性液体的常见问题，例如用于涂敷3D细胞造就用凝胶的平板的基质

。同样，调整流速、吹出体积和沉降功夫等参数能够预防此类问题，并确
；示壬⒉，从而确保细胞均匀成长

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无菌性

持久细胞造就最关键的调整之一是维持无菌性

。诸如细菌和真菌等传染源对真核细胞有害，并最终导致细胞殒命

。此表，即便少量传染也可能导致异常了局和不正确的科学结论

。在整个过程中维持无菌能够削减传染的频率和数量，削减细胞、资源和功夫的损失

。无菌前提能够通过预防病原体通过受传染的设备、造就基、试剂、造就箱、工作台以及出缺点或未密封的细胞造就容器进入细胞造就物来实现

。高效微
？掌℉EPA）过滤器和紫表灯此刻蕴含在自动化系统中，用于维持无菌前提以及对平台和尝试室用具进行灭菌

。自动化工作流程的手动处置削减也最大限度地削减了传染物的进入

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活细胞成像的整合

当贴壁细胞在造就瓶中的聚合度达到80%时，细胞必须消化解离并转移到其他容器中持续成长

。这被称为传代

。此表，必须定期监测细胞活力，以确保没有表型变动

。自动化液体处置设备能够与第三方设备集成，对细胞造就物进行活细胞成像

。自动成像能够确保细胞在评估过程中只从最佳造就前提中被筛选

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